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重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109的遗传稳定性研究
王淑娟1 ,崔沛2 ,王东方2 ,闫若潜1
1. 河南省动物疫病预防控制中心
Study on the heredity stability of a recombinant Escherichia coli pQE30-ChIL-6/JM109
摘要 为研究携带鸡白细胞介素-6（ChIL-6）基因的重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109的遗传稳定性。本文通过菌株传代方法将重组菌株pQE30-ChIL-6/JM109在含有氨苄青霉素的 LB 液体培养基中连续传至100代，选取第1、10、20、50、100代菌株为研究对象，分别比较各代次菌株的菌落形态、细菌形态、质粒保有率、生长速度等的差异；取各代次菌株提取质粒DNA且分别进行双酶切及PCR鉴定、DNA序列比较；诱导表达各代次菌株，比较其重组ChIL-6蛋白的表达水平及免疫反应性。结果表明，各代次菌株菌落形态、生长速度等方面无明显差异；在传至100代时的质粒保有率为89%；各代次菌株重组质粒电泳图谱、酶切图谱、PCR图谱均未改变，未见ChIL-6基因变异；各代次菌株的蛋白电泳图谱、ChIL-6蛋白表达量、ChIL-6蛋白的体外促鸡脾淋巴细胞增殖活性无明显差异。重组大肠杆菌 pQE30-ChIL-6/JM109具有较好的遗传稳定性。
关键词 ：
收稿日期: 2017-04-06;
出版日期: 2017-05-15
通讯作者: 闫若潜
E-mail: yrq168@126.com
引用本文:
王淑娟,崔沛,王东方等. 重组大肠杆菌pQE30-ChIL-6/JM109的遗传稳定性研究[J]. 现代畜牧兽医, 2017, (05): 1-7.
WANG Shu-Juan,CUI Pei,WANG Dong-Fang et al. Study on the heredity stability of a recombinant Escherichia coli pQE30-ChIL-6/JM109[J]. , 2017, (05): 1-7.
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