现代畜牧兽医
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现代畜牧兽医  2022, Vol. 404 Issue (07): 1-6    DOI:
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鸡传染性支气管炎病毒一步法RT-qPCR检测方法的建立
王晓权1,马晓璐1,张东野2,曹祁峰3,李冰1
1. 锦州医科大学畜牧兽医学院;2. 锦州市农业农村综合服务中心;3. 辽宁益康生物股份有限公司
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摘要 

        研究旨在建立一种快速、高效、敏感、特异性强的方法以检测鸡传染性支气管炎病毒。通过比对鸡源传染性支气管炎病毒M基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条特异性TaqMan探针;通过优化反应条件,建立检测鸡传染性支气管炎病毒的一步法实时定量RT-qPCR方法。以重组质粒为模板制作标准曲线,并对方法各项指标进行评价。结果显示,该曲线标准曲线方程为:y=-3.442logx+37.614,相关系数R2=0.991;此方法灵敏度较高,最低可检测到1.0×102copies/μL,比普通PCR灵敏100倍;特异性强,与4种常见鸡病毒病无交叉反应,重复性试验组间以及组内变异系数均小于2%。研究表明,此方法操作简便,可直接用作粗提RNA的模板检测,灵敏度高、特异性强、重复性好,可应用于鸡传染性支气管炎病毒早期检测。

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作者相关文章
王晓权
马晓璐
张东野
曹祁峰
李冰
关键词鸡传染性支气管炎病毒    一步法实时定量RT-qPCR   M基因     
收稿日期: 2022-05-11;
基金资助:

2021年度辽宁省教育厅科学研究项目(LJKZ0800);

通讯作者: 李冰,博士,教授,研究方向为动物传染病防控。   
引用本文:   
王晓权,马晓璐,张东野等. 鸡传染性支气管炎病毒一步法RT-qPCR检测方法的建立[J]. 现代畜牧兽医, 2022, 404(07): 1-6.
$author.xingMing_EN,$author.xingMing_EN,$author.xingMing_EN et al. [J]. , 2022, 404(07): 1-6.
 
没有本文参考文献
[1] 孟嘉欣,张旭. 2018 年黑龙江省大庆地区犬冠状病毒 M 基因分子流行病学调查[J]. 现代畜牧兽医, 2020, 380(07): 41-44.

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