猪流行性腹泻病毒S基因与SEA基因融合表达及免疫原性评价

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摘要试验旨在构建pET-28a-S-SEA融合表达质粒，并评价S-SEA蛋白的免疫原性。本研究根据大肠杆菌密码子偏嗜性，对我国猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行毒株（GenBank: LT906620.1）的S基因与金黄色葡萄球菌肠毒素A（SEA）基因（GenBank：MH053151.1）进行优化，通过柔性连接肽（GGGGS）连接后，克隆至表达载体pET-28a, 得到pET-28a-S-SEA重组质粒，转化至宿主菌BL21（DE3）中诱导表达，经SDS-PAGE和 Western Blot检测后，对最佳表达条件进行摸索。在此基础上，将亲和层析后的重组蛋白，免疫6周龄的雌性 BALB/c 小鼠，对免疫小鼠的血清特异性抗体水平和淋巴细胞增殖指数进行检测。结果：成功构建pET-28a-S-SEA质粒，且在大肠杆菌中获得高效表达；小鼠试验结果表明，纯化的S-SEA蛋白能够诱导小鼠产生特异性免疫反应，促进淋巴细胞增殖，具有良好的免疫原性，为进一步研究猪流行性腹泻亚单位疫苗提供帮助。

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关键词：猪流行性腹泻病毒（PEDV） S蛋白金黄色葡萄球菌肠毒素A 密码子优化表达免疫原性 porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) Spilke protein SEA codon optimization prokaryotic expression immunogenicity

收稿日期: 2019-12-23; 出版日期: 2020-02-15

基金资助:PEDV多抗原表位与SEA基因共表达重组沙门氏菌构建及免疫原性研究

通讯作者: 王书全 E-mail: lnmcwsq1968@163.com

引用本文:

唐奇,张溪研,费东亮等. 猪流行性腹泻病毒S基因与SEA基因融合表达及免疫原性评价[J]. 现代畜牧兽医, 2020, (02): 7-13.

TANG Qi,ZHANG Xi-Yan,FEI Dong-Liang et al. Fusion Expression and immunogenicity evaluation of PEDV Spilke Gene and SEA Gene[J]. , 2020, (02): 7-13.

没有本文参考文献

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