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| ANXA2真核表达载体的构建 |
| 刘容秀,凌莹,喜琴琴,李琼毅 |
| 西北民族大学 |
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| Optimization of the Construction Process of Eukaryotic Expression Vector |
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| 摘要 本文以膜联蛋白A2(Annexin A2, ANXA2)真核表达载体的构建过程为基础，介绍一种易于成功构建真核表达载体的方法。方法：Hela细胞来源的cDNA为模板，以半套式PCR为基础，通过两次PCR的方法，可获得5’端添加Kozak序列并融合表达HA标签基因和ANXA2的基因片段Kozak-HA-ANXA2，回收后克隆到pMD-18T克隆载体，获得合适的酶切位点，再采用双粘端连接法将其克隆入慢病毒真核表达载体pTRIP中。结果：经双酶切和测序之后确定真核重组载体pTRIP-HA-humANXA2构建成功。结论：通过半套式PCR方法构建真核表达载体成功率高，为下一步细胞表达实验创造条件。 |
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| 关键词： 真核表达载体,载体构建,膜联蛋白A2
Eukaryotic expression vector, vector construction, Annexin A2
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收稿日期: 2019-06-04;
出版日期: 2019-08-15
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通讯作者: 李琼毅
E-mail: lqy@xbmu.edu.cn
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引用本文: |
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刘容秀,凌莹,喜琴琴等. ANXA2真核表达载体的构建[J]. 现代畜牧兽医, 2019, (08): 17-21.
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LIU Rong-Xiu,LING Ying,XI Qin-Qin et al. Optimization of the Construction Process of Eukaryotic Expression Vector[J]. , 2019, (08): 17-21.
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2019, Vol. 