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鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用
李海利1 ,易秀玲2 ,徐引弟1 ,焦文强3 ,王克领1 ,李奎3
1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所
Establishment and Application of Polymerase Chain Reaction for Infectious Laryngotracheitis Virus
摘要 根据GenBank传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因序列，设计合成了1对特异性引物。以ILTV DNA为模板，建立了检测ILTV的PCR检测方法。通过优化PCR反应条件，成功扩增出一条约690 bp的目的基因片段。而鸡传染性法氏囊病病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒基因组均未扩增为出相应的片段。敏感性试验检测出其DNA最小检出量为10-2μg。重复性试验中对3份检测为传染性喉气管炎病毒阳性病料进行检测，发现3次重复检测的结果完全一致。临床应用中运用上述优化的PCR反应条件进行PCR检测临床送检的16份疑似鸡传染性喉气管炎病毒感染病料，结果显示检出阳性样品6份，将阳性样品的PCR扩增产物克隆后序列分析显示均为鸡传染性喉气管炎病毒。上述结果表明建立的PCR方法具有良好的特异性，敏感性和稳定性，可应用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。
关键词 ： 鸡传染性喉气管炎病毒
PCR
检测
Infectious Laryngotracheitis Virus
PCR
Detection
收稿日期: 2016-02-16;
出版日期: 2016-03-15
通讯作者: 王克领
E-mail: keling24@163.com
引用本文:
李海利,易秀玲,徐引弟等. 鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用[J]. 现代畜牧兽医, 2016, (03): 1-7.
LI Hai-Li,YI Xiu-Ling,XU Yin-Di et al. Establishment and Application of Polymerase Chain Reaction for Infectious Laryngotracheitis Virus[J]. , 2016, (03): 1-7.
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