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| 鸡传染性法氏囊病病毒RT-PCR检测方法的建立及应用 |
| 李继娟,张敏 |
| 河南省焦作市动物疫病预防控制中心 |
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| Establishment and Application of a Method for Detection of Infectious Bursal Disease Virus RT-PCR |
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| 摘要 为建立一种鸡传染性法氏囊病RT-PCR检测方法，根据GenBank中已发表的鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus，IBDV)的基因组序列(登录号：X92760)。设计合成1对引物，通过优化PCR反应的条件，建立针对IBDV的RT-PCR检测方法。结果显示：RT-PCR扩增产物在610bp条带处可见到与预期大小相符的特异性条带；将扩增产物纯化回收后连接到pMD18-T克隆载体上，利用EcoRⅠ/Hind Ⅲ双切酶鉴定后可在610bp处见到特异性条带，测序结果与IBDV序列一致；利用设计的引物同时对IBDV、ILTV、NDV、MDV、AIV进行RT-PCR检测，只有IBDV的扩增结果为阳性，其余均为阴性；建立的RT-PCR检测方法的灵敏度为（10 pg）0.1 μL；用该检测方法对同种病料重复检测，结果完全一致；应用建立的方法对临床病例进行检测，16份样品中有6份检测为阳性。以上结果表明，建立的RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点，可用于鸡传染性法氏囊病的诊断和流行病学的研究。 |
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| 关键词： 鸡传染性法氏囊病
RT-PCR
检测
Infectious Bursal Disease
RT-PCR
Detection
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收稿日期: 2018-01-31;
出版日期: 2018-04-15
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通讯作者: 李继娟
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引用本文: |
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李继娟,张敏. 鸡传染性法氏囊病病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 现代畜牧兽医, 2018, (04): 1-6.
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2018, Vol. 