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犬细小病毒悬浮培养工艺研究 |
李凤艳,陈生雷,刘艳霞,刘梦成,姜斌,舒秀伟 |
辽宁益康生物股份有限公司 |
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摘要 研究旨在证明犬细小病毒(CPV)悬浮培养的可能性,提高CPV P6株抗原的病毒含量,降低转瓶生产不同批次间疫苗质量差异,生产质量稳定的疫苗产品。试验利用大孔的纤维编织物BioNOCⅡ型微载体所提供的巨大表面积,实现Vero细胞高密度培养,建立了Tide-cell生物反应器大规模培养CPV P6株抗原制备工艺。结果显示:生物反应器Tide-cell载体罐内接入1.0×1010个F81种子细胞,在优化的参数条件下培养,用RPMI 1640培养液经过96 h培养,细胞总数为1.0×1011个;在葡萄糖消耗量约为5 g/(L·h)时,按照病毒感染复数(MOI)=0.02将生产种毒CPV P6株接入Tide-cell微载体细胞培养瓶内,补加含8%血清的RPMI 1640病毒维持液至50 L,调整pH值为7.2~7.3,培养48 h收获,病毒含量至少为107.43 TCID50/mL。 |
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关键词: 生物反应器
犬细小病毒
CPV P6株
微载体
疫苗
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收稿日期: 2023-09-01;
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通讯作者: 陈生雷,本科,高级兽医师,研究方向为兽用生物制品;
舒秀伟,硕士,正高级兽医师,研究方向为兽用生物制品。
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作者简介: 李凤艳,硕士,高级兽医师,研究方向为兽用生物制品。 |
引用本文: |
李凤艳,陈生雷,刘艳霞等. 犬细小病毒悬浮培养工艺研究[J]. 现代畜牧兽医, 2024, 424(3): 29-31.
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