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PRV感染PK-15细胞后相关炎性通路及炎症因子表达变化 |
张王芝1舒相华1张莹1杨广佳1全伟2储宗秀3宋春莲1 |
1. 云南农业大学动物医学院2. 云南省农村科技服务中心3. 昆明金航辰生物科技有限公司 |
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摘要 试验旨在了解猪伪狂犬病毒(PRV)感染宿主后炎症动态变化,以猪肾细胞为宿主,选用炎性通路中Toll样受体4 (TLR4)、骨髓分化一级反应蛋白88 (MyD88)、核因子kB (NF-kB)和炎症因子干扰素-α(IFN-α)、干扰素-β (IFN-β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)和白细胞介素-6 (IL-6)为研究指标。通过PRV感染PK-15细胞和BHK-21细胞,对比分析两者细胞感染量(TCID50)、细胞病变(CPE)和病毒载量;选取PRV较敏感细胞,设计炎性通路因子特异性引物,用实时荧光定量PCR检测不同时间点TLR4、MyD88和NF-kB表达量,ELISA测定IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子含量。结果显示,PK-15细胞、BHK-21细胞的TCID50分别为10-8.98/0.1 mL和10-8.58/0.1 mL;在感染PRV第18 h均见典型CPE。PK-15细胞病毒载量较高,且18 h内PK-15的CPE程度与病毒载量呈正相关。与未感染的PK-15细胞相比,PRV感染PK-15细胞后TLR4、MyD88和NF-kB表达量均在感染后0~6 h时升高,感染后第12 h时极显著降低(P<0.01);除IFN-β外的炎症因子含量总体呈先下降后上升趋势。研究表明,PRV感染宿主过程中可引起TLR4-MyD88-NF-kB通路表达量升高,促进炎症因子变化抵抗病毒感染,TLR4-MyD88-NF-kB炎症通路在抗PRV感染过程中发挥重要作用。 |
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关键词: PRV
PK-15细胞
炎症通路
炎症因子
RT-qPCR
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收稿日期: 2023-09-08;
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基金资助:云南省农业重大科技专项“威信县生猪健康养殖和粪污利用关键技术创新与示范(202202AE090027)”; |
通讯作者: 宋春莲,博士,副教授,硕士生导师,研究方向为动物疫病防控及动物组织胚胎学。
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作者简介: 张王芝,硕士,研究方向为兽医公共卫生学。 |
引用本文: |
张王芝1舒相华1张莹1杨广佳1全伟2储宗秀3宋春莲1. PRV感染PK-15细胞后相关炎性通路及炎症因子表达变化[J]. 现代畜牧兽医, 2024, 423(2): 9-14.
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$author.xingMing_EN. [J]. , 2024, 423(2): 9-14.
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