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| 家兔Zfx基因shRNA干扰载体构建及验证 |
| 夏欢1,邹声雷2,李超程2,安洪勇2,刘明达2,贾斌2 |
1. 石河子大学
2. 石河子大学动物科技学院
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| The shRNA interference vector construction and validation from Lepus Zfx gene |
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| 摘要 目的：本研究主要是为了构建出针对家兔Zfx基因的shRNA重组载体及效果验证。方法：根据家兔Zfx基因mRNA序列特征，设计出3条shRNA片段；再与线性化的pLL 3.7载体进行连接重组；最后经过qRT-PCR检测Zfx基因mRNA表达量筛选出有效重组表达载体并通过体内试验进行效果验证。结果表明：实验组shRNA-c和shRNA-f干扰效率分别为74%和67%，与空白对照组相比差异极显著（P<0.01）；实验组shRNA-e干扰效果为17%，与空白对照组相比差异不显著（P>0.05）。用shRNA-c和shRNA-f进行体内试验，结果显示，两试验组雄性率分别为44.92%（P>0.05），33.16%（P<0.01）。结论：本试验成功构建针对家兔Zfx基因的重组载体，体内试验显示子一代出现性别偏移，说明Zfx基因对动物的性别决定有一定作用，关于导致体内验证出现反转的原因仍需进一步验证。 |
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| 关键词： Zfx基因
shRNA
pLL3.7慢病毒骨架载体
Zfx gene
shRNA
pLL3.7 lentiviral vector
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收稿日期: 2019-04-08;
出版日期: 2019-05-15
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通讯作者: 夏欢
E-mail: 841646226@qq.com
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引用本文: |
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夏欢,邹声雷,李超程等. 家兔Zfx基因shRNA干扰载体构建及验证[J]. 现代畜牧兽医, 2019, (05): 14-19.
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XIA Huan,ZOU Sheng-Lei,LI Chao-Cheng et al. The shRNA interference vector construction and validation from Lepus Zfx gene[J]. , 2019, (05): 14-19.
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2019, Vol. 