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| 副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立及应用 |
| 梁乔1,杨本勇1,石霖1,李井春1,张健赵凤菊2 |
1. 辽宁省动物疫病预防控制中心
2.
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| Establishment and Preliminary Application of PCR for Detecting Haemophilus parasuis |
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| 摘要 建立一种快速鉴别诊断副猪嗜血杆菌的PCR检测方法，克服传统鉴定方法特异性差的缺点，为猪的副猪嗜血杆菌病的快速诊断及流行病学调查提供有效的技术支撑，通过对副猪嗜血杆菌infB基因序列进行分析，利用Premier5.0软件设计并合成了1对特异性引物，建立了针对副猪嗜血杆菌的PCR鉴别诊断方法。通过多次试验确定了最佳退火温度为49℃。通过灵敏度试验表明，PCR检测方法最低能检测到的DNA浓度为18.1×10-6 ug/mL。通过特异性试验表明，本方法具有较高的特异性。同时，通过对本方法检测出的阳性样品infB序列分析发现，与GenBenk中公布的其他副猪嗜血杆菌infB序列同源性均在98.2%~99%以上 。表明建立的方法灵敏度高、特异性强，可以应用于副猪嗜血杆菌的实验室诊断。 |
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| 关键词： 关键词：副猪嗜血杆菌
聚合酶链反应
建立
Key words: Haemophilus porcine
polymerase chain reaction
establishment
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收稿日期: 2018-06-21;
出版日期: 2018-09-15
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通讯作者: 梁乔
E-mail: 1209674992@qq.com
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引用本文: |
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梁乔,杨本勇,石霖等. 副猪嗜血杆菌PCR检测方法的建立及应用[J]. 现代畜牧兽医, 2018, (09): 10-13.
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LIANG Qiao,YANG Ben-Yong,SHI Lin et al. Establishment and Preliminary Application of PCR for Detecting Haemophilus parasuis[J]. , 2018, (09): 10-13.
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2018, Vol. 