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| 铜离子鳌合物人工抗原的合成与鉴定 |
| 孙勇,付世杰,秦保亮,王亚楠,王自良 |
| 河南科技学院 |
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| 摘要 摘 要:为获得铜离子螯合物人工免疫原,采用异硫氰酯法，以异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)为双功能螯合剂，将载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别与Cu2+偶联，得到免疫原(Cu2+-ITCBE-BSA)和包被原(Cu2+-ITCBE-OVA)。通过紫外分光光度法(UV)、电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)，变性聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫学检测(Immunoassay)的方法来对所获得的免疫原进行鉴定。结果显示获得人工抗原的浓度是9.21 mg/mL；Cu2+的含量为16.83 μg/mL；分子量比BSA大；3号小鼠间接ELISA效价达到1：51200以上，阻断ELISA检测Cu2+-EDTA的半数抑制浓度(IC50)为36.73 ng/mL。因此可知采用异硫氰酯法合成的人工抗原(Cu2+-ITCBE-BSA)合成成功，并具有较好的免疫原性，为抗铜离子单克隆抗体(mAb)的进一步研制奠定了基础。 |
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| 关键词： 铜离子
抗原合成
鉴定
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收稿日期: 2015-10-29;
出版日期: 2016-05-05
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| 基金资助:国家“十二五”科技支撑计划重大专项“重金属离子抗体的制备及其产品研发 ” |
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通讯作者: 王自良
E-mail: 15836090463@163.com
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引用本文: |
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孙勇,付世杰,秦保亮等. 铜离子鳌合物人工抗原的合成与鉴定[J]. 现代畜牧兽医, 2015, (12): 12-16.
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SUN Yong,FU Shi-Jie,QIN Bao-Liang et al. [J]. , 2015, (12): 12-16.
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2015, Vol. 